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文档简介
1、人类可以感知到甜、酸、苦、咸、鲜5种基本的味觉,甜味作为其中最重要的一种味觉,预示着身体的能量来源—碳水化合物的存在。雌激素与甜味感知紧密相连,可以通过影响机体对甜味的感知能力而改变人们对碳水化合物的摄取,与肥胖、糖尿病的发生密切相关。但是对于雌激素和甜味感知之间关系的研究,目前仍然缺乏可靠的数据。本实验以行卵巢切除术的C57BL/6小鼠为动物模型,采用行为学、分子生物学、形态学等技术手段,在整体水平上研究雌激素对小鼠甜味感知阈值、摄食
2、、体重变化、味蕾的数量、最大横截面积和甜味信号传导相关分子和蛋白在口腔及肠道中表达的影响。
本研究首先通过行卵巢切除术建立一个雌激素缺失的小鼠模型,通过检测卵巢切除术后的小鼠体内雌激素的含量、体重和摄食量来对模型进行验证。在模型成功建立的基础上,进一步采用行为学测试、免疫组化实验、qRT-PCR和Western blot等实验技术检测卵巢切除术后不同时期(1W、2W、4W、6W和8W)雌激素对小鼠舌面上味蕾的形态、数目和味细胞
3、内与甜味传导相关的分子及蛋白表达量的影响,研究雌激素对小鼠甜味感知在外周和分子生物学方面的作用机理。结果显示,行卵巢切除术后的小鼠血液内雌激素含量明显降低,体重显著性增加。通过行为学测试发现,雌激素缺乏的小鼠对安赛蜜和蔗糖的偏好阈值均提高了,并且降低了对低浓度时AK和蔗糖的偏好率,但通过对卵巢切除的小鼠给予雌激素替代治疗后,其体重及对AK和蔗糖的偏好阈值和偏好率均恢复到正常对照组水平。研究了雌激素对外周味觉系统的影响,发现雌激素对味蕾的
4、形态和横截面积没有显著性的影响。同时我们对甜味传导相关的分子和蛋白在舌面和软腭中的表达量进行了实验,结果显示,卵巢切除术后的小鼠,舌面上甜味受体T1R3的表达量显著性降低,而软腭上甜味信号传导的关键基因 Gα-gustducin、PLCβ2、TRPM5的表达量也有降低的趋势,并且在个别时间点上与对照组相比达到显著性差异;在十二指肠和空肠中的实验发现,T1R3在十二指肠中表达量显著低于对照组,在空肠中T1R3和TRPM5的表达量与对照组相
5、比也有降低的趋势。综上所述,雌激素增加了小鼠对甜味的敏感性,使小鼠对较低浓度的AK和蔗糖溶液显示出偏好,而雌激素的缺失提高了小鼠对AK和蔗糖溶液的偏好阈值,降低了对低浓度时AK和蔗糖的偏好率。味觉的调节是多种组织和传导通路协同作用的结果,这种行为学上的差异主要是雌激素影响了和味觉传导通路中相关分子和蛋白的表达量,使甜味传导关键信号分子 T1R3在分子和蛋白的表达水平显著性降低,对TRPM5、PLCβ2、Gα-gustducin等相关信号
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